莲藕石蜡切片
莲藕石蜡切片是一种常用的组织学实验方法,用于观察植物组织的细微结构。以下是莲藕石蜡切片的基本步骤:
取材
确定所取莲藕材料的来源及部位,选择纵切或横切。
取材要迅速,防止组织发生进一步变化,材料体积要适宜。
固定
最常用的固定液为FAA(万用固定液),其优点是固定时间灵活,短则数小时,长则数月或数年。
固定后应充分水洗,除去组织内的固定液及其结晶沉淀,以免影响后续染色效果。
脱水
目的是去除组织中的水分,使透明剂能够进入。
使用梯度酒精溶液进行脱水,流程为70%---85%---95%---100%---100%,每步1小时至2小时不等。
注意保证脱水梯度和每一步脱水时间,确保水完全脱净,但避免过度脱水导致组织变脆或收缩。
浸蜡与包埋
用石蜡取代透明剂,使石蜡浸入组织起支持作用。
浸蜡程序包括低温浸蜡(36℃)和高温浸蜡(55-60℃,高于石蜡熔点3℃)。
低温浸蜡是将材料浸泡在二甲苯和石蜡的混合液中过夜(12-24小时),然后进行高温浸蜡,将材料倒入纯石蜡中,共需24小时,期间需更换三次纯石蜡。
切片
将包埋好的蜡块用刀片修成规整的梯形,粘于小木块上。
使用切片机进行切片,传统方法是将蜡块切成规整的梯形,然后粘附在小木块上进行上机切片。
通过以上步骤,可以获得高质量的莲藕石蜡切片,用于进一步的显微镜观察和分析。